玉米赤(chì)黴烯酮(Zearaleaone)又稱F-2毒素，是玉米(mǐ)赤黴菌的(dí)代(dài)謝(xiè)產物，具有(yǒu)類雌激(jī)素樣作用，具(jù)有較強的生(shēng)殖毒性(xìng)和(hé)致畸(jī)作(zuò)用(yòng)，可(kě)引起動(dòng)物發生雌激素亢(kàng)進症，導(dǎo)致(zhì)動(dòng)物不孕(yùn)或流產(chǎn)，對家禽，豬(zhū)，牛和羊的影(yǐng)響較大(dà)，給(gěi)畜牧(mù)業(yè)帶來(lái)很大的經(jīng)濟損失。
 

　　玉米赤黴烯酮(tóng)免疫(yì)親(qīn)和柱試(shì)驗(yàn)原(yuán)理(lǐ)：
 

　　本產(chǎn)品的(dí)測定的(dí)基(jī)礎是(shì)抗(kàng)原(yuán)抗體反應，玉(yù)米(mǐ)赤黴烯(xī)酮單克隆(lóng)抗(kàng)體連(lián)接在柱(zhù)內凝(níng)膠上(shàng)，樣品中(zhōng)的玉(yù)米赤黴(méi)烯酮經過提取，過濾(lǜ)，稀(xī)釋，然(rán)後將(jiāng)樣(yàng)品提取液(yè)緩慢的通過玉米赤黴烯酮(tóng)免(miǎn)疫(yì)親和層析柱，在(zài)免疫(yì)親(qīn)和柱(zhù)內，玉(yù)米(mǐ)赤黴烯(xī)酮與(yǔ)抗體結合(hé)，之(zhī)後洗(xǐ)滌免疫親和柱(zhù)除(chú)去沒有(yǒu)被結合的(dí)其他(tā)物質。用甲醇(chún)洗脫(tuō)玉米赤(chì)黴烯(xī)酮(tóng)，然後注(zhù)入到分(fēn)析(xī)儀器中用於檢(jiǎn)測(cè)。
 

　　玉(yù)米(mǐ)赤黴烯酮(tóng)免疫親和(hé)柱(zhù)淨化過程：
 

　　1，3mL柱(zhù)管取(qǔ)出上方(fāng)堵頭，減去上堵(dǔ)頭螺紋(wén)下突(tū)出部(bù)分，插回柱子(zǐ)上(1mL柱管(guǎn)上(shàng)方(fāng)堵頭取(qǔ)出後(hòu)斜 剪(jiǎn)斷(duàn)，然後(hòu)再(zài)插回柱子上)，另(lìng)一(yī)端與20mL針(zhēn)筒(tǒng)固定(dìng)後使(shǐ)用(yòng)
；
 

　　2，準確(què)移取(qǔ)上(shàng)述(shù)混匀(yún)濾液，注入針筒(tǒng)中，調(tiáo)節針筒(tǒng)壓(yā)力使其以2秒/滴的速度緩慢通過免(miǎn)疫親和柱(zhù)
；
 

　　3，用20mL 水衝洗柱子，流速1秒/滴，棄去(qù)流出(chū)液，直至2~3mL空氣通(tōng)過柱體(tǐ)，保(bǎo)證柱(zhù)子內(nèi)沒(méi)有殘(cán)餘 液體
；
 

　　4，準確加入2mL甲醇(色(sè)譜級(jí))洗(xǐ)脫，流(liú)速自然重力(lì)，直至2~3mL空氣通(tōng)過柱體(tǐ)，保(bǎo)證柱(zhù)子內沒(méi)有 殘(cán)餘液體。收集(jí)全部洗脫液(yè)
；
 

　　5，過有機(jī)濾(lǜ)膜(mó)(孔徑0.22μm)後(hòu)，進行(háng)HPLC測(cè)定(dìng)
；或用(yòng)氮(dàn)氣(qì)吹幹，經流動相(xiāng)復(fù)溶(róng)，過有機濾(lǜ)膜 (孔(kǒng)徑0.22μm)後，參照(zhào)GB 5009.209-2016或GB/T 28716-2012條(tiáo)件進行(háng)HPLC測(cè)定(dìng)。
 

　　結(jié)果判定：
 

　　經玉米(mǐ)赤(chì)黴烯酮(tóng)免疫親(qīn)和柱(zhù)淨化(huà)後(hòu)，收集到的(dí)甲醇(chún)洗脫液可(kě)直接使用(yòng)熒光計或者(zhě)HPLC檢測，也可使用薄層色譜或者(zhě)酶聯免疫試(shì)劑(jì)盒(hé)進(jìn)行檢測。收(shōu)集(jí)到的1ml洗(xǐ)脫液(yè)中(zhōng)的玉(yù)米(mǐ)赤黴烯酮含(hán)量(liáng)相當於1g樣品(pǐn)中玉米赤(chì)黴烯(xī)酮含量。
 

　　過程(chéng)中(zhōng)的(dí)注(zhù)意事項：
 

　　1. 親和柱(zhù)使用前，需要(yào)提前(qián)平(píng)衡30min至(zhì)室(shì)溫(wēn)
；
 

　　2. 親(qīn)和(hé)柱(zhù)與20mL針筒連(lián)接(jiē)時(shí)，一定旋緊20mL針(zhēn)筒(tǒng)與堵(dǔ)頭(tóu)連接(jiē)處，防止上(shàng)樣(yàng)過(guò)程漏(lòu)液
；
 

　　3. 采用大量程移液器準確移取(qǔ)混(hùn)匀(yún)濾液(yè)進行上樣
；樣液(yè)流過(guò)柱體(tǐ)的速(sù)度不能過快(kuài)，采用固相(xiāng)萃(cuì)取(qǔ)架過柱 時(shí)可以調節流速為2秒/滴，若無此設備，自然(rán)重力流(liú)速也可
；
 

　　4. 衝洗柱子時保持自(zì)然(rán)重力流速(sù)即可(kě)
；對(duì)於醬(jiàng)油，醋(cù)，油類，玉(yù)米加(jiā)工(gōng)副產(chǎn)物及飼料等顏(yán)色較(jiào)深的樣品， 可(kě)以先用10mL 0.1%吐溫(wēn)20-PBS清洗(xǐ)，再用10 mL 10%甲(jiǎ)醇(chún)-水衝洗，後(hòu)用10mL水(shuǐ)衝洗(xǐ)柱子(zǐ)
；
 

　　5. 柱(zhù)子衝(chōng)洗過後(hòu)一定(dìng)要(yào)用洗(xǐ)耳球吹幹柱子內殘(cán)餘的(dí)液體(tǐ)，但不(bù)能讓(ràng)柱(zhù)子幹(gān)燥時間(jiān)過長(cháng)，要立(lì)即加入洗脫 液(yè)
；
 

　　6. 采(cǎi)用(yòng)玻(bō)璃移液管準確(què)移取(qǔ)2mL色譜(pǔ)級(jí)甲(jiǎ)醇進(jìn)行(háng)洗(xǐ)脫，自(zì)然重力(lì)流(liú)速(sù)即(jí)可(kě)(不可施(shī)壓)，後一定(dìng)要(yào)用(yòng) 洗耳(ěr)球吹幹柱子內(nèi)殘餘(yú)的甲醇(chún)，收集全部(bù)洗脫(tuō)液
；
 

　　7. 洗(xǐ)脫液(yè)必需(xū)先(xiān)經過0.22μm濾(lǜ)膜過濾才能進行(háng)HPLC測(cè)定
；
 

　　8. HPLC測定值(zhí)接(jiē)近高檢出(chū)值時，樣(yàng)本實際(jì)含量(liáng)可能大於(yú)柱(zhù)容(róng)量而造(zào)成流(liú)穿，需減少上樣(yàng)體(tǐ)積(jī)。
 

　　適用(yòng)範圍及性(xìng)能：
 

　　用(yòng)於定量檢(jiǎn)測穀(gǔ)物(wù)，酒類等食(shí)品和(hé)飼料(liào)等樣(yàng)本(běn)中的玉(yù)米(mǐ)赤黴烯(xī)酮時的樣品前處理。