熒光免(miǎn)疫分(fēn)析(xī)的原(yuán)理介紹(shào)

熒光(guāng)免(miǎn)疫檢測(cè)技術具有(yǒu)專一性強(qiáng)，靈敏度(dù)高，實(shí)用(yòng)性好等優點，因此它(tā)被(bèi)用於測(cè)量含量很低(dī)的生物活性(xìng)化合(hé)物，例如(rú)蛋白(bái)質（酶，接受(shòu)體，抗(kàng)體），激(jī)素(sù)（甾族化合物，甲(jiǎ)狀(zhuàng)腺(xiàn)激(jī)素，酞(tài)激素），藥物及微生(shēng)物等。

對夾心(xīn)型(xíng)免疫分(fēn)析來說，其(qí)反應原(yuán)理是在(zài)免(miǎn)疫(yì)反應的(dí)載(zǎi)體(tǐ)上(shàng)固(gù)定過量(liáng)的Ab，然(rán)後加(jiā)入一(yī)定(dìng)量(liáng)的Ag，免(miǎn)疫(yì)反(fǎn)應後(hòu)，再加(jiā)入過(guò)量(liáng)的(dí)標記(jì)抗體(tǐ)（Ab-L），以形成“三明治(zhì)”式夾(jiā)心(xīn)免(miǎn)疫復合(hé)物。樣品(pǐn)中(zhōng)存在(zài)的Ag越多，結合的Ab-L也越多(duō)，夾(jiā)心免疫(yì)復合物的(dí)標(biāo)記(jì)熒(yíng)光信號就(jiù)越強。反應過(guò)程(chéng)如下(xià)：Ab+Ag≒Ab：Ag≒Ab：Ag：Ab-L。

作為(wéi)免疫(yì)分析法的一種(zhǒng)，FIA同樣(yàng)存(cún)在兩種(zhǒng)模式(shì)，即競(jìng)爭型(xíng)和夾(jiā)心(xīn)型。其(qí)中競(jìng)爭(zhēng)型（以標(biāo)記(jì)抗(kàng)原的競爭(zhēng)型為例(lì)）的測定(dìng)原(yuán)理是基於(yú)未標(biāo)記的抗原（Ag）和標記(jì)抗原（Ag-L）競爭結(jié)合有限(xiàn)的抗體(tǐ)（Ab）而實現的免疫(yì)分析(xī)法。檢測時，Ab和Ag-L的(dí)濃度(dù)是(shì)固定(dìng)的。當未標(biāo)記(jì)的(dí)Ag加(jiā)到(dào)Ab和Ag-L的免疫(yì)混合物中後(hòu)，Ag和Ab的結(jié)合使(shǐ)得Ag-L與Ab的免疫復合物的量(liáng)減(jiǎn)少。樣品(pǐn)中存(cún)在的Ag越(yuè)多，Ab結合(hé)的Ag-L便越少，從(cóng)Ab-Ag-L免疫(yì)復合物的減少(shǎo)或遊離Ag-L的(dí)增(zēng)加(jiā)，可以定量測(cè)定出(chū)樣品(pǐn)中待(dài)測抗原(yuán)的(dí)含量(liáng)。其反(fǎn)應過程(chéng)如(rú)下：Ag+Ag-L+Ab≒（Ag：Ab）+（Ag-L：Ab）