軟(ruǎn)海(hǎi)綿酸(suān)(Okadaic acid,OA)是(shì)一(yī)種由甲(jiǎ)藻(zǎo)類(如(rú)鰭藻屬和(hé)原(yuán)甲藻(zǎo)屬)產(chǎn)生(shēng)的腹瀉性貝(bèi)類素(DSP toxins),可(kě)引起人類(lèi)急性(xìng)惡心(xīn),嘔(ǒu)吐,腹瀉和腹痛等症狀(zhuàng)。腹(fù)瀉性(xìng)貝(bèi)相關(guān)的有多種(zhǒng)化學素,它(tā)們是親油性(xìng)的聚醚類(lèi)或大(dà)環內酯(zhǐ)類化合(hé)物,已經(jīng)確(què)認(rèn)DSP的成分(fēn)有3個組(zǔ)分(fēn):第(dì)1組(zǔ)酸性素-軟(ruǎn)海(hǎi)綿酸(OA)及其(qí)衍生物鰭藻(zǎo)素(DTX1,DTX2,DTX3);第2組分為(wéi)中性素-扇貝(bèi)素(PTXs)組;第3組為其(qí)他(tā)素-蝦夷(yí)扇貝素(YTX)及其衍生(shēng)物(wù)45-OHYTX,至今(jīn)至少(shǎo)有12種成(chéng)分(fēn),其(qí)中(zhōng)9種的(dí)結構(gòu)已(yǐ)明(míng)確,與腹瀉有關的(dí)主(zhǔ)要是(shì)第1組(zǔ)分。FDA製(zhì)定(dìng)的高水平為0.2ppm。歐(ōu)盟(méng)建立了(liǎo)軟(ruǎn)海綿(mián)酸(OA)160ug/kg(ng/g或(huò)者(zhě)ppb)的(dí)水平。
貝類毒(dú)素(sù)檢測(cè)試劑(jì)盒基於(yú)競爭性ELISA酶聯免疫的方法,腹瀉性貝(bèi)類(lèi)素的抗體包被於酶(méi)標孔內(nèi),樣品與腹瀉性(xìng)貝(bèi)類素-酶標(biāo)記物(wù)加入(rù)到(dào)微孔(kǒng)內(nèi),若樣(yàng)品中有腹瀉性貝(bèi)類素殘留,它將與貝類素-酶(méi)標(biāo)記物共同競爭酶(méi)標板包被的(dí)抗體。加入TMB底(dǐ)物後,顏(yán)色發(fā)生變化,經酶標儀檢測讀數後確定樣(yàng)品中(zhōng)腹瀉性貝(bèi)類(lèi)素(sù)的含量(liáng)。顏色(sè)的深淺(qiǎn)與素的殘留量成(chéng)反比(bǐ)。
注意(yì)事項
1,標(biāo)準(zhǔn)品(pǐn)中含有腹瀉性貝類素(sù),請小心(xīn)使(shǐ)用。
2,不要(yào)使(shǐ)用過期的試劑(jì)盒。
3,不同批次的試(shì)劑(jì)盒不要混用,抗體和微(wēi)孔板具(jù)有盒與(yǔ)批(pī)次的特異性。
4,盡(jìn)量(liáng)保(bǎo)持(chí)室溫(25±2.5)°C,避(bì)免(miǎn)在通風口操(cāo)作(zuò)防止(zhǐ)溫度過低(dī),過(guò)熱和(hé)/或者蒸發。同樣(yàng)的(dí),不要(yào)在(zài)陽光(guāng)直射(shè)下(xià)實(shí)驗(yàn),防(fáng)止過熱(rè)及蒸發。在孵(fū)育(yù)期(qī)間(jiān),如(rú)果(guǒ)工作台溫度過低,應(yīng)該鋪(pū)墊(diàn)若(ruò)幹(gān)紙巾(jīn)或者其他物(wù)料。
5,水(shuǐ)質量很(hěn)重要(yào),確(què)保使用蒸餾或(huò)者去離子水(shuǐ)。
6,加入樣(yàng)品(pǐn)或者試劑(jì)到空的微孔(kǒng)板時,吸嘴(zuǐ)靠於微孔(kǒng)接(jiē)近底(dǐ)部,並(bìng)保持接(jiē)觸(chù)。
7,孵(fū)育時間的(dí)計(jì)算(suàn)越規(guī)範越好,保(bǎo)持(chí)添加標準品(pǐn)的*性(xìng),先(xiān)添加標準品後(hòu)添加(jiā)樣品(pǐn)。
8,從低(dī)濃度到(dào)高濃(nóng)度地添加標準品,降低影(yǐng)響標準品(pǐn)曲綫(xiàn)質量的風險(xiǎn)。
9,將微孔(kǒng)板置於(yú)放(fàng)有幹(gān)燥劑(jì)的密封袋中,冷藏保存。