熒(yíng)光(guāng)免疫(yì)分析(xī)的原理

熒光(guāng)免疫(yì)檢測(cè)技術具(jù)有專(zhuān)一(yī)性強(qiáng)，靈敏度高(gāo)，實用性好(hǎo)等優(yōu)點(diǎn)，因此它(tā)被用(yòng)於測(cè)量含量(liáng)很低(dī)的生物活性(xìng)化合物，例(lì)如(rú)蛋白質（酶，接(jiē)受(shòu)體，抗體(tǐ)），激素（甾族化合物，甲狀腺(xiàn)激素，酞激素），藥(yào)物及微生物(wù)等。

作(zuò)為免(miǎn)疫(yì)分析法(fǎ)的一(yī)種，FIA同樣存(cún)在兩(liǎng)種(zhǒng)模(mó)式，即(jí)競爭(zhēng)型和夾(jiā)心(xīn)型(xíng)。其中(zhōng)競(jìng)爭(zhēng)型（以(yǐ)標(biāo)記(jì)抗(kàng)原的(dí)競爭型(xíng)為例）的測(cè)定原理是(shì)基(jī)於(yú)未標(biāo)記的(dí)抗原（Ag）和標記抗(kàng)原（Ag-L）競爭結合(hé)有(yǒu)限的(dí)抗體（Ab）而實現的(dí)免疫分(fēn)析法(fǎ)。檢測時，Ab和Ag-L的濃度(dù)是固定的。當未標(biāo)記的Ag加到(dào)Ab和(hé)Ag-L的(dí)免(miǎn)疫混(hùn)合物(wù)中後(hòu)，Ag和Ab的結合使得Ag-L與Ab的(dí)免(miǎn)疫(yì)復(fù)合(hé)物的(dí)量(liáng)減(jiǎn)少(shǎo)。樣(yàng)品中(zhōng)存在的(dí)Ag越(yuè)多，Ab結合的(dí)Ag-L便越少，從Ab-Ag-L免(miǎn)疫復合物(wù)的減少(shǎo)或(huò)遊離(lí)Ag-L的(dí)增加(jiā)，可以定量(liáng)測定出(chū)樣(yàng)品(pǐn)中待測(cè)抗(kàng)原的(dí)含量。其反(fǎn)應過程如下(xià)：Ag+Ag-L+Ab≒（Ag：Ab）+（Ag-L：Ab）

對夾(jiā)心型免(miǎn)疫(yì)分析來(lái)說，其反應(yīng)原(yuán)理是(shì)在(zài)免(miǎn)疫反應的載體上(shàng)固定過(guò)量的Ab，然後加(jiā)入一定(dìng)量(liáng)的Ag，免疫反應後，再加入過量的標記抗(kàng)體（Ab-L），以形(xíng)成“三(sān)明治”式夾(jiā)心免疫(yì)復(fù)合物(wù)。樣(yàng)品中存在(zài)的(dí)Ag越多，結合的Ab-L也越(yuè)多，夾心(xīn)免疫復合(hé)物的標(biāo)記熒(yíng)光信(xìn)號(hào)就越強(qiáng)。反(fǎn)應(yīng)過程(chéng)如下：Ab+Ag≒Ab：Ag≒Ab：Ag：Ab-L。